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Crean un ratón totalmente transparente usando detergente

El grupo de Viviana Gradinaru también ha utilizado la técnica en los tejidos humanos

Es una ventana de oportunidades. Un tratamiento químico que puede convertir a los ratones en transparentes permitirá a los investigadores ver el cuerpo y el cerebro en un detalle sin precedentes.
Para examinar los órganos en una escala microscópica los investigadores tienden a diseccionar y cortarlos en rodajas, estudiando cada sector de forma individual o mediante una computadora para generar un modelo 3D del órgano de las rodajas. Es un proceso lento que puede ser inexacto, ya que las rebanadas están a menudo mal alineadas. También son difíciles de estudiar las células que se distribuyen escasamente a través del cuerpo, ya que pueden llegar a perderse a causa de la disección. riñores coloreados de un ratón transparente Una mejor idea es hacer los órganos transparentes, permitiendo que las células y sus frágiles conexiones se estudien en sus ubicaciones originales. El problema es que los lípidos - sustancias cerosas que incluyen grasa - bloquean la luz que pasa a través de los tejidos. Los lípidos no se pueden eliminar debido a que también dan su estructura a los órganos. Si se quitan, el tejido se derrumbará. proceso para convertir un ratón en transparentePero en abril, un grupo de la Universidad de Stanford en California logró superar este obstáculo consiguiendo hacer transparente un cerebro entero de ratón (vídeo de arriba). El grupo trató al órgano con formaldehído para detener cualquier reacción química, manteniendo las células en movimiento y preservando el tejido. Ellos sumergieron luego el cerebro acrilamida - un gel transparente que se une a las proteínas y otras células para formar una matriz de apoyo que puede reemplazar a los lípidos. Para el paso final, el cerebro se bañó en un detergente para disolver los lípidos y se colocó en un campo eléctrico, lo que aceleró el proceso de disolución. Los lípidos se disuelven durante semanas o meses y el órgano se vuelve transparente. Sin embargo, este enfoque no funciona para grandes volúmenes de tejido debido a que el gel de acrilamida no puede llegar a las células profundas en el órgano. El campo eléctrico también puede causar que el tejido se caliente y se hinche, causando daños. Para solucionar estos problemas, Viviana Gradinaru en el Instituto de Tecnología de California en Pasadena, y sus colegas adaptaron la técnica. Para empezar le quitaron la piel del animal. Entonces, en lugar de utilizar un campo eléctrico para limpiar los lípidos, bombearon detergente alrededor de todo el ratón a través de sus propios sistemas circulatorios. Al hacerlo sin el campo eléctrico, el equipo evitó el daño tisular. La inflamación mínima que se produjo cuando fue absorbido el gel se vio limitada por los huesos y la musculatura de los animales. ratón transparente con detergente Usando esta técnica, el equipo de Gradinaru fue capaz de hacer que los órganos periféricos fuesen transparentes dentro de dos días y un ratón completamente transparente dentro de dos semanas. El equipo luego retiró cualquier gran hueso que pudiese bloquear la vista de ciertas células, inyectando productos químicos fluorescentes en el animal para resaltar células específicas, tales como las células intestinales o del riñón, y visualizaron esas células usando microscopios. El resultado es un mapa muy claro de las estructuras microscópicas del cuerpo y el cerebro. intestinos de un ratón transpartente "Ahora estamos trabajando en el mapeo del sistema nervioso", dice Gradinaru. Trabajar exactamente donde se inician y finalizan los nervios puede ayudar a informar a los tratamientos que funcionan mediante la estimulación del sistema nervioso, dice ella. "Por ejemplo, hay casos en los que se utiliza la estimulación eléctrica para ayudar a tratar el Parkinson, el control de la vejiga o el dolor y se aplican estimuladores eléctricos a los nervios por todo el cuerpo. Conocer exactamente donde corren los nervios hacia y desde, y sus funciones, mejorarían los tratamientos". El grupo de Gradinaru también ha utilizado la técnica en los tejidos humanos. "Hemos tratado biopsias de cáncer de la piel para identificar qué tipo de células están presentes", dice ella. El equipo fue capaz de identificar las células cancerosas y otras moléculas diminutas presentes en el tejido, así como con las técnicas de imagen actuales. Mientras tanto, Karl Deisseroth, en la Universidad de Stanford, quien desarrolló la técnica inicial de transparencia, informa de un proceso de elaboración de un cerebro humano completamente transparente. Artículo científico: Single-Cell Phenotyping within Transparent Intact Tissue through Whole-Body Clearing
Modificado por última vez enJueves, 05 Noviembre 2015 19:23